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电泳是分子生物学研究中不可缺少的重要分析方法。电泳一般分为两类:自由界面电泳和区带电泳。自由界面电泳不需要支持物,如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳、微量电泳等,目前很少使用。但区带电泳需要使用各种物质作为支持物,如滤纸、醋酸纤维素膜、非凝胶支持物、凝胶支持物和硅胶-G薄层等。琼脂糖凝胶电泳是分子生物学领域中Z常用的方法。所谓电泳,是指带电粒子在电场中的运动。不同的物质在电场中以不同的速度运动,因为它们的电荷和分子量不同。根据这一特点,电泳可用于不同物质的定性或定量分析,也可用于某种混合物的组分分析或单组分提取,在实验研究中具有重要意义。下面简单介绍一下它的使用方法、注意事项以及常见问题的解决方法。
一、使用方法
1.首先用导线将电泳槽的两个电*与电泳仪的DC输出端连接起来,注意不要接反*性。
2.将电泳仪的电源开关转到off位置,并将电压旋钮调到Z小。根据工作需要选择稳压稳流方式和稳压稳流范围。
3.打开电源,慢慢转动电压调节旋钮,直到达到所需电压,设定电泳终止时间,此时电泳开始。
4.工作结束后,将所有旋钮和开关拨到零位或关闭,将电泳插头拨到一边。
二、注意事项
1.电泳仪通电后,禁止人体接触电*、电泳物体及其他可能带电的部位,也不准在电泳槽内取放东西。如有必要,请先关闭电源以避免触电。同时,仪器须有良好的接地端子,防止漏电。
2.仪器通电后,任何时候都不要加或拔输出线插头,以防短路。虽然仪器内部有保险丝,但短路仍可能造成仪器损坏。
3.由于不同介质支架的电阻值不同,电泳时通过的电流量也不同,电泳速度和电泳到终点所需的时间也不同,所以不同介质支架的电泳不应在同一台电泳仪上同时进行。
4.当总电流不超过仪器的额定电流(Z大电流范围)时,可以多槽联合使用,但要注意不要过载,否则容易影响仪器的使用寿命。
5.在某些特殊情况下,需要检查仪器的电泳输入时,允许在稳态下空载开机,但在稳态下开机前须连接负载,否则电压表指针会有较大的跳动,容易造成不必要的人为机器损坏。
6、使用过程中发现异常现象,如巨响、放电声或异常气味,须立即切断电源,进行维修,以免发生事故。
三、常见问题及其解决方法
1.为什么电泳仪的输出达不到设定值?
答:①电泳仪的输出状态服从欧姆定律:在电压U=电流I×(电泳槽)电阻R相对不变的情况下,U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任一参数不变,其他参数也不变;任何一个参数变化,其他参数也成正比变化;(2)如果电泳仪的输出电压U达不到预设值,先观察I或P是否恒定或已达到电泳仪规定的Z大值I或P(JY电泳仪有明确的指示标志)。如果没有达到*限值,可以通过增加常量I或P的设置(必要时增加到*限值)来提高电压输出;③如果电泳仪的电流I达不到预设值,可以调整电压U或功率P;(4)如果电泳仪的功率p达不到预设值,可以调整电压u或电流I。
2.电脑控制的电泳仪出现过压报警怎么办?
答:①检查是否空载使用;②电泳槽中是否没有缓冲液;③电泳槽内的铂丝是否断裂。
3.过流保护的原因是什么?
答:①检查电泳槽是否短路;②检查缓冲器是否选择错误。
4.漏电保护的原因是什么?
答:①是否有液体溅到仪器内部或输出接口上;②是否有大量灰尘落入仪器。
5.风扇停止运转或发出异响怎么办?
回答:更换风扇。
6.电压电流不输出怎么办?
答:①检查安全管是否损坏;②打开机箱,检查前面板输出座与主板之间连接的插头是否脱落;(3)检查瓷变压器插头是否脱落或用万用表检查每组两端应为通道。